• phòng thí nghiệm-217043_1280

Làm thế nào để làm sạch ô nhiễm trong nhà máy tế bào

Một khi các tế bào chúng ta nuôi cấy

nhà máy sản xuất tế bàobị ô nhiễm, hầu hết đều khó xử lý.Nếu các tế bào bị ô nhiễm có giá trị và khó lấy lại, có thể sử dụng các phương pháp sau để loại bỏ chúng.

1. Sử dụng kháng sinh

Thuốc kháng sinh có hiệu quả hơn trong việc tiêu diệt vi khuẩn trongnhà máy tế bào.Dùng thuốc phối hợp sẽ hiệu quả hơn dùng thuốc đơn độc.Thuốc phòng ngừa có hiệu quả hơn thuốc sau khi bị nhiễm bẩn.Thuốc phòng ngừa thường sử dụng kháng sinh kép (penicillin 100u/mL cộng với streptomycin 100μg/mL).Sau khi bị nhiễm bẩn, phương pháp làm sạch cần lớn gấp 5 đến 10 lần so với lượng thông thường.Thuốc nên được sử dụng trong 24 đến 48 giờ sau khi bổ sung, sau đó thay thế bằng thói quen thông thường.Chất lỏng văn hóa.Phương pháp này có thể có hiệu quả trong giai đoạn đầu của ô nhiễm.Ngoài penicillin và streptomycin, các loại kháng sinh được sử dụng còn có thể bao gồm gentamicin, kanamycin, polymyxin, tetracycline, nystatin, v.v. Thường được sử dụng là kanamycin 400 đến 800 μg/mL hoặc tetracycline 200 μg/mL.Môi trường được thay đổi 2 đến 3 ngày một lần và được truyền từ 1 đến 2 thế hệ để điều trị.Trong những năm gần đây, đã có báo cáo cho rằng dẫn xuất 4-fluoro, 2-hydroxyquinoline (Ciprofloxacin, Cip), dẫn xuất Pleu-romutilin (dẫn xuất Pleu-romutilin, BM-Cyclin2: BM-1 và dẫn xuất tetracycline (BM-2)) là thuốc kháng sinh được sử dụng rộng rãi. có hiệu quả trong việc tiêu diệt mycoplasma khi sử dụng đơn lẻ hoặc kết hợp.Ba loại kháng sinh này đều được điều chế thành dung dịch đậm đặc 250X trong PBS và bảo quản ở -20°C để sử dụng sau.Nồng độ sử dụng Cip là 10 μg/mL, BM-1 là 10 μg/mL và BM-2 là 5μg/mL.Khi sử dụng, trước tiên hãy hút môi trường nuôi cấy bị ô nhiễm, thêm môi trường nuôi cấy RPMI1640 chứa BM-1, sau đó hút môi trường nuôi cấy sau 3 ngày, thêm môi trường nuôi cấy RPMI1640 chứa BM-2 và nuôi cấy trong 4 ngày, v.v. trong 3 ngày liên tiếp .vòng, cho đến khi soi bằng kính hiển vi nhuộm huỳnh quang 33258 chứng minh rằng mycoplasma đã bị loại bỏ, sau đó thêm môi trường nuôi cấy thông thường vào để nuôi cấy và truyền qua 3-4 lần.

Cách làm sạch ô nhiễm trong nhà máy sản xuất tế bào1

2. Xử lý nhiệt

Ủ môi trường nuôi cấy mô bị ô nhiễm ở 41°C trong 18 giờ có thể tiêu diệt mycoplasma nhưng lại có tác dụng phụ đối với tế bào.Do đó, cần tiến hành thử nghiệm sơ bộ trước khi điều trị để xác định thời gian gia nhiệt có thể tiêu diệt mycoplasma ở mức tối đa và ít tác động nhất đến tế bào.Phương pháp này đôi khi không đáng tin cậy.Nếu xử lý bằng thuốc trước rồi đun nóng ở 41°C thì hiệu quả sẽ tốt hơn.

3. Sử dụng huyết thanh đặc hiệu mycoplasma

Ô nhiễm mycoplasma có thể được loại bỏ bằng huyết thanh miễn dịch mycoplasma thỏ 5% (hiệu giá ngưng kết hồng cầu 1:320 hoặc cao hơn).Bởi vì kháng thể đặc hiệu có thể ức chế sự phát triển của mycoplasma nên nó sẽ âm tính 11 ngày sau khi điều trị bằng kháng huyết thanh và vẫn âm tính 5 tháng sau đó.là tiêu cực.Tuy nhiên, phương pháp này rắc rối hơn và không thuận tiện, tiết kiệm như sử dụng kháng sinh.

4. Các phương pháp khác

Ngoài các phương pháp loại bỏ ô nhiễm nêu trên còn có các phương pháp tiêm chủng và khử trùng ở động vật, phương pháp thực bào đại thực bào, phương pháp bổ sung bromouracil vào chất ô nhiễm.chai văn hóasau đó chiếu xạ chúng bằng ánh sáng, các phương pháp lọc, v.v., nhưng chúng đều rắc rối và kém hiệu quả hơn.Do đó, một khi ô nhiễm mycoplasma xảy ra, trừ khi nó có giá trị đặc biệt quan trọng, nó thường bị loại bỏ và nuôi cấy lại.

vui lòng liên hệ Whatsapp & Wechat: +86 180 8048 1709


Thời gian đăng: 24/10/2023