Nuôi cấy bình lắcĐang trong giai đoạn sàng lọc chủng và nuôi cấy (thử nghiệm thí điểm), điều kiện nuôi cấy phải càng gần với điều kiện nuôi cấy sản xuất lên men, khối lượng công việc lớn, thời gian dài, vận hành phức tạp.Các yếu tố ảnh hưởng đến hiệu quả cao của nuôi cấy bình lắc chủ yếu là nhiệt độ nuôi cấy, biên độ lắc của máy lắc, lượng bình lắc, độ pH của môi trường nuôi cấy, độ nhớt của môi trường, v.v. Nhiệt độ nuôi cấy: nhiệt độ phát triển của sợi nấm của các loại nấm ăn khác nhau cũng khác nhau, hầu hết nhiệt độ tăng trưởng thích hợp là từ 22oC đến 30oC, nếu nhiệt độ nuôi quá thấp thì sợi nấm phát triển chậm;Khi nhiệt độ quá cao, các hạt sợi nấm bị lỏng lẻo và thưa thớt, sức sống và chất lượng của sợi nấm giảm đi.

Tần số lắc và nạp chai lắc hiệu quả cao: nấm ăn được là nấm hiếu khí, nuôi cấy lỏng, chủ yếu bằng cách hấp thụ oxy hòa tan trong môi trường nuôi cấy.Oxy hòa tan trong môi trường nuôi cấy chủ yếu bị ảnh hưởng bởi độ nhớt của môi trường, lượng chất lỏng trong thùng chứa, tần số dao động và các yếu tố khác.Tần số lắc lớn, bình lắc nhỏ, nồng độ môi trường lên tới, lượng oxy hòa tan trong môi trường cao và ngược lại thấp.Thông thường tốc độ máy lắc quay là 180-220 vòng/phút, chuyển động tịnh tiến là 80-120 vòng/phút, biên độ 6-7cm.

Ph của môi trường nuôi cấy: PH của môi trường nuôi cấy ảnh hưởng trực tiếp đến sự hấp thụ chất dinh dưỡng, hoạt động của enzyme và sự phát triển của sợi nấm.Độ pH cụ thể phải được điều chỉnh trước khi khử trùng, hầu hết các loại nấm ăn được ở độ pH 2,0-6,0.Để ngăn chặn sự thay đổi mạnh mẽ của PH trong môi trường nuôi cấy, canxi cacbonat, phốt phát và các chất đệm khác thường được thêm vào môi trường nuôi cấy.

Độ nhớt trung bình: Độ nhớt trung bình ảnh hưởng trực tiếp đến lượng oxy hòa tan trong đó, đồng thời cũng ảnh hưởng đến sự hình thành các hạt sợi nấm.Kết quả cho thấy khi độ nhớt của môi trường nuôi cấy tăng thì đường kính viên sợi nấm giảm, số lượng tăng và năng suất tăng.Do đó, theo yêu cầu của chủng chất lỏng về đường kính của sợi nấm, phải cấu hình môi trường nuôi cấy có độ nhớt nhất định.Nuôi cấy tế bào là một công việc khắt khe, nhất là khi cần nuôi cấy bằng máy lắc, chẳng hạn như máy lắc hiệu suất cao thì cần được xem xét một cách toàn diện hơn, để đảm bảo quá trình nuôi cấy tế bào diễn ra suôn sẻ.